Η ανασυνδυαζόμενη ανθρώπινη λευκωματίνη ΕΧΕΙ τις λειτουργίες ισοδύναμα στο pHSA από την άποψη της προώθησης της αύξησης κυττάρων

Η ανασυνδυαζόμενη ανθρώπινη λευκωματίνη ΕΧΕΙ τις λειτουργίες ισοδύναμα στο pHSA από την άποψη της προώθησης της αύξησης κυττάρων

Γρήγορες λεπτομέρειες

1. Πηγή: Σιτάρι ρυζιού (Oryza Sativa)
2. Φυσική εμφάνιση: Off-white έως ελαφριά μπεζ λυοφιλοποιημένη σκόνη (HY100M1)
3. Διατύπωση: Λυοφιλοποιείται χωρίς το σταθεροποιητή ή ενεργό στην επιφάνεια πράκτορα.
4. Αγνότητα: Περισσότερο από 99% όπως καθορίζεται από SDS-PAGE και την ανάλυση HPLC.
5. Ενδοτοξίνη: Λιγότερο από 0.125EU/mg

Περιγραφή

Η ανθρώπινη λευκωματίνη ορών είναι η αφθονότερη πρωτεΐνη στο ανθρώπινο πλάσμα. Μπορεί να μεταφέρει τις ορμόνες, τα λιπίδια και άλλα μόρια και να διατηρήσει την ωσμωτική πίεση. Το OsrHSA είναι μια ανασυνδυαζόμενη ανθρώπινη λευκωματίνη ορών που προέρχεται από τα σιτάρια ρυζιού, η οποία παρέχει μια άριστη λύση για το ζωικό ελεύθερο μέσο. Έναντι FBS, pHSA και BSA, OsrHSA έχει την υψηλότερη αγνότητα και την άριστη συνέπεια batch. Εν τω μεταξύ, OsrHSA χρησιμοποιείται ευρέως ως έκδοχο, σταθεροποιητή και ενσωμάτωση του πράκτορα στις βιο-φαρμακευτικές εφαρμογές.

Για να εξετάσει εάν OsrHSA ήταν λειτουργικά ισοδύναμο με το pHSA από την άποψη της προώθησης της αύξησης κυττάρων, οι μελέτες διεξήχθησαν με τρεις κοινές γραμμές κυττάρων: Κινεζική ωοθήκη χάμστερ (CHO), Vero, και SP2/0. Η επεξεργασία με είτε pHSA είτε OsrHSA (1 g/L) σε DMEM που περιέχει 5% FBS αύξησε εντυπωσιακά την πυκνότητα και τη βιωσιμότητα κυττάρων έναντι της επεξεργασίας ελέγχου (5% FBS μόνο) σε όλες τις γραμμές κυττάρων. Τα επίπεδα αύξησης αύξησης που παρατηρήθηκαν με OsrHSA και pHSA ήταν σχεδόν τα ίδια. Η προώθηση της αύξησης κυττάρων ήταν συγκρίσιμη με αυτήν των κυττάρων CHO σε 10% FBS. Συγκεκριμένα, OsrHSA παρουσίασε αύξηση 20% στη μέγιστες βιωσιμότητα και την πυκνότητα έναντι του pHSA στα κύτταρα Vero. Ειδικότερα, ο τίτλος του αντισώματος (IgG1+ κ) που μετρήθηκε στο μέσο πολιτισμού κυττάρων SP2/0 που συμπληρώθηκαν με OsrHSA ήταν σημαντικά υψηλότερος από αυτός που παρατηρήθηκε για τα ίδια κύτταρα που συμπληρώθηκαν με το pHSA. Με βάση αυτά τα αποτελέσματα, καταλήγουμε στο συμπέρασμα ότι OsrHSA απέδωσε καθώς επίσης και pHSA στην προώθηση της αύξησης κυττάρων, και μπορούμε έτσι αποτελεσματικά να αντικαταστήσουμε pHSA στα μέσα κυτταροκαλλιέργειας.

Η ανασυνδυαζόμενη ανθρώπινη λευκωματίνη ορών (rHSA) έχει την καλή αποτελεσματικότητα, όπως OsrHSA έχει ίδιο το δεύτερο και η τριτογενής δομή, οι φυσιολογικές και βιοχημικές ιδιότητες με ΕΧΟΥΝ από το πλάσμα. Επιπλέον, έναντι ΕΧΕΙ από το πλάσμα, rHSA έχει μια χαμηλότερη άνοση υποκίνηση πηγής, και διαδραματίζει έναν καλύτερο ρόλο στην επιτάχυνση της αύξησης και του μεταβολισμού κυττάρων, επειδή rHSA είναι ζωικό συστατικό ελεύθερο, το οποίο μπορεί να αποφύγει τα prions ή τους μολυσματικούς παράγοντες ιών.

Η ανασυνδυαζόμενη ανθρώπινη λευκωματίνη ορών που παράγεται σε Oryza sativa (OsrHSA) έχει τεκμηριωθεί προηγουμένως για να μοιραστεί τις παρόμοιες φυσικές και βιοχημικές ιδιότητες ως πλάσμα-παραγόμενη ανθρώπινη λευκωματίνη ορών. Επομένως προσπαθήσαμε να ερευνήσουμε σε αυτήν την έκθεση εάν OsrHSA θα μπορούσε να χρησιμεύσει ως μια πιθανή πηγή αντικατάστασης για την πλάσμα-παραγόμενη ανθρώπινη λευκωματίνη ορών. Μέσο δοκιμής περιέχουμε 1mg/ml OsrHSA. Τα κύτταρα δοκιμασμένα χωρίστηκαν την ημέρα 0 και πλύθηκαν δύο φορές με αποθηκευμένο φωσφορικό άλας αλατούχο (PBS) την επόμενη μέρα πρίν μεταπηδούν στο εξεταστικό μέσο ή το μέσο ελέγχου.

Μορφολογική αξιολόγηση των hESCs που καλλιεργούνται στις καταδειγμένες υγιείς, OsrHSA συμπαγείς αποικίες 1mg/mL με την ελάχιστη διαφοροποίηση όταν συγκρίνεται με συμπληρωμένα τα pHSA μέσα.