Η ανθρώπινη λευκωματίνη ορών ανασυνδυαζόμενη ΕΧΕΙ είναι δομικά και βιοχημικά αντίτιμο στο pHSA

Η ανασυνδυαζόμενη ανθρώπινη λευκωματίνη ορών ΕΧΕΙ είναι δομικά και βιοχημικά αντίτιμο στο pHSA

Περιγραφή

Η ανασυνδυαζόμενη ανθρώπινη λευκωματίνη ορών βιοτεχνολογιών Healthgen είναι ζωική προέλευση ελεύθερη, τα οποία αποφεύγουν αποτελεσματικά οποιοδήποτε πιθανό κίνδυνο των ζωικών μολυσματικών παραγόντων, των βακτηριδίων, των prions, του ιού και μεταδοτικής πρωτεϊνικής ασθένειας. Η συγκεκριμένη πλατφόρμα έκφρασης ενδοσπερμίων ρυζιού είναι εύκολο να ήταν μεγάλης κλίμακας. Το ενδοσπέρμιο ρυζιού έχει το πρωτεϊνικό σώμα, το οποίο μπορεί σταθερότητα και βιοδραστικότητα πρωτεϊνών συντηρήσεων. Αυτή τη στιγμή, η ικανότητα παραγωγής είναι σχεδόν 1000 κλ/έτος.

Το OsrHSA είναι δομικά και βιοχημικά αντίτιμο στο pHSA.

Το εκφρασμένο OsrHSA έχει την ίδια μοριακή μάζα, την ακολουθία αμινοξέος, το τέρμα ν και Γ, και το σημείο τήξης όπως pHSA. Το κυκλικό φάσμα διχροϊσμού (CD) OsrHSA στην κοντινή και μακριά-UV περιοχή που αντιστοιχείται που του pHSA, που δείχνει ότι και η δευτεροβάθμια και τριτογενής δομή OsrHSA είναι ίδια με εκείνους του pHSA. Η φασματοσκοπική ανάλυση περαιτέρω επιβεβαίωσε ότι OsrHSA έχει την ίδια διαμόρφωση όπως pHSA.

Για να χαρακτηρίσει τη δομή OsrHSA, osrHSA-μυριστικός όξινος ένας σύνθετος κρυσταλλώθηκε, και η δομή λύθηκε από τη μοριακή αντικατάσταση χρησιμοποιώντας προηγουμένως καθορισμένος ΕΧΕΙ τη δομή σε έναν καθαρισμό 2,5 Å (κώδικας 1BJ5 PDB ταυτότητα), παρουσιάζοντας μια τελική ρ-ελεύθερη αξία 0,303. Ένα κρύσταλλο δύο ανεξάρτητων μορίων OsrHSA λήφθηκε σε μια ασυμμετρική μονάδα. Η γενική δομή OsrHSA είναι μια μορφή καρδιών που διαμορφώνεται από τρεις ελικοειδείς περιοχές, οριζόμενες το Ι, ΙΙ, και ΙΙΙ, και με τα μυριστικά οξέα που δεσμεύονται στις υδροφοβικές κοιλότητες. Ένα superposition όλων των ατόμων α-άνθρακα των δομών κρυστάλλου OsrHSA και pHSA οδηγημένος σε ένα rmsd 0,67 Å για τον κώδικα 2I2Z ταυτότητας PBD και 0,69 Å για 1BJ5.

Καμία προφανής διαφορά στα conformations κύριος-αλυσίδων δεν προσδιορίστηκε μεταξύ του pHSA και OsrHSA, το οποίο καταδεικνύει ότι OsrHSA στα κύτταρα ενδοσπερμίων ρυζιού είναι διπλωμένο στην ίδια δομή ως pHSA στο πλάσμα αίματος. Όπως αναμενόταν, 17 δεσμοί δισουλφιδίου προσδιορίστηκαν ως γνήσιοι δεσμοί δισουλφιδίου, και ένα ελεύθερο cysteine (Cys) υπόλειμμα παρατηρήθηκε στη θέση 34. ΕΧΕΙ είναι γνωστός για να ενεργεί ως πρωτεΐνη μεταφορέων, κυρίως μέσω δύο ελλιμενίζοντας περιοχών για τα φάρμακα και 7-9 περιοχών για τα λιπαρά οξέα (27). Οκτώ μυριστικά οξέα παρατηρήθηκαν ότι συνδεδεμένος στον ανασυνδυαζόμενο ΕΧΕΙ το μόριο, και όλες οι περιοχές συνδέσεων λιπαρού οξέος σε OsrHSA προσδιορίστηκαν στις ίδιες θέσεις όπως στο pHSA. Δύο drugbinding περιοχές που βρέθηκαν στο pHSA ήταν επίσης παρούσες σε OsrHSA. Η περιοχή Ι είναι μια υδροφοβική κοιλότητα που βρίσκεται στο subdomain ΙΙ, που σκιαγραφείται από τα υπολείμματα F211, W214, A215, και L238. Δύο συστάδες των πολικών υπολειμμάτων αρμόδιων για την αλληλεπίδραση ligand εποικήθηκαν από τα αμινοξέα Y150, H242, R257, και K195, K199, R218, R222, αντίστοιχα. Η περιοχή ΙΙ ήταν μια άλλη υδροφοβική τσέπη στο subdomain IIIA που αποτελείται από L387, Y411, L453, V433, και L430. Μια πολική περιοχή, φιαγμένη επάνω από R410, K414, και S489, βρέθηκε σε αυτήν την περιοχή συνδέσεων. Η δομική τοπολογία αυτών των περιοχών συνδέσεων σε OsrHSA προτείνει ότι μπορεί να εκτελέσει τις ίδιες βιολογικές λειτουργίες όπως pHSA.